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alpco試劑常見問題與解答
產品時間：2023-02-15
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alpco常見問題與解答
問：我購買的試劑盒可以使用什么樣的樣品類型？
A.每種類型的試劑盒都經過了方案中所示樣品類型的驗證。所有其他樣本類型都必須經過內部驗證。請聯系ALPCO的產品支持團隊，了解產品用戶可能進行的其他樣本類型測試的更多信息。
問：該試劑盒是否與其他物種交叉反應？
A.每種試劑盒均已針對方案中所示的物種進行了驗證。盡管可能存在交叉反應性，但需要在內部對其他物種進行驗證。請聯系ALPCO的產品支持團隊，了解產品用戶可能進行的物種驗證的更多信息。
問：我運行了多少標準和控制？
A.每個試劑盒至少包括一套標準品（或一小瓶待稀釋的標準品），在大多數情況下包括一個或兩個對照品。每次進行分析時，必須運行標準品和對照品（如果包括），強烈建議運行所有標準品/對照品/和樣品一式兩份。
問：我可以使用其他試劑盒或批次的試劑嗎？
答：沒有。不要用其他套件或批次的部件替代。
問：我可以修改培養時間或溫度嗎？
答：沒有。請不要偏離協議。
問：我可以使用過期的工具包嗎？
答：沒有。如果試劑盒超過了試劑盒標簽上規定的有效期，則不應使用該試劑盒。
問：我可以使用放置在室溫下的試劑盒嗎？
A.請確保試劑盒及其組件按照試劑盒插頁中的指示存放。有關試劑盒在室溫下穩定性的更多信息，請聯系ALPCO的產品支持團隊。
問：我可以跳過在化驗中運行對照嗎？
答：否。如果提供了對照品，請務必在每次分析中運行對照品。對照品的濃度應在分析證書規定的范圍內。
問：我可以用多通道移液管清洗盤子嗎？
答：我們不建議使用多通道移液管。必須用足夠且相等的力分配沖洗緩沖液，以正確沖洗井。我們建議使用Statmatic清洗噴嘴tricontinent或自動洗板機。請參閱網站“資源"部分的“學習中心"選項卡，獲取顯示正確洗滌技術的視頻，或單擊此處。
問：有必要對我的樣品進行布局嗎？
答：非常重要的是，要知道你的標準品、對照品和樣品在板上的位置，以便正確生成結果。單擊此處獲取可下載的圖版。這也有助于在潷析過程中，在板條松動的情況下，在板上標記板條（在兩端使用小標簽）。
問：為什么洗滌步驟如此重要？
A.正確清洗平板是運行任何成功ELISA的一個非常關鍵和重要的方面。洗盤子時要保持一致。過快或過慢地清洗平板、不全清洗或抽吸以及讓孔保持干燥都是影響測定精度的因素。我們不建議為此目的使用多通道移液管。多通道移液管沒有施加足夠的壓力來底去除未結合的材料，這將導致更高的背景噪聲。網站的學習中心部分提供了顯示正確洗滌技術的視頻，或單擊此處。
問：我可以冷凍和解凍我的樣品多少次？
A.建議的冷凍/解凍周期因套件而異。我們建議避免重復冷凍和解凍循環，除非手冊中另有說明。如果采集的樣本量允許，準備并冷凍等分試樣，以消除或減少冷凍/解凍循環。
問：我可以使用自己的“自制"緩沖器嗎？
A.每個試劑盒都含有稀釋劑和緩沖液，其配方與特定的樣品類型緊密匹配。如果使用未隨試劑盒提供的組件進行檢測，制造商將不保證試劑盒的性能。
問：如果稀釋劑用完了怎么辦？
A.提供足夠的試劑，以在遵循方案時運行整個試劑盒。如果您的研究類型需要更高的稀釋度，請在設置分析之前計算所需的稀釋劑量，并且可以購買額外的稀釋劑。請聯系客戶支持以獲取有關單個組件可用性的信息。
問：我的控制裝置超出范圍。我的數據是否無效？
A.對照品的濃度必須在分析證書規定的范圍內。如果對照超出范圍，化驗可能無效。此外，確保已使用協議中建議的曲線擬合。如果提供了多個建議，則使用適合標準數據點的回歸方法。
問：我的標準曲線沒有得到很好的值。我可以使用協議中的示例值嗎？
答：沒有。切勿使用示例值來計算化驗結果。應根據每次測定獲得的標準值/校準值生成樣品濃度。
問：我的樣本產生的OD值超出標準范圍。我還能計算濃度嗎？
A.只能使用標準曲線范圍內的樣本值。超出此范圍的值通常不是線性的，可能導致錯誤的推斷結果。
問：我的標準曲線很好，但我的樣本沒有得到信號。為什么？
A.樣品可能含有分析物，但基于試劑盒的靈敏度，無法檢測。樣本的矩陣也可以掩蓋檢測。確保按照方案中的規定進行稀釋，并審查程序，以確保所有試劑的添加量和順序正確。
問：我可以運行多少個樣本？
A.ALPCO現在提供了一個工具來幫助計算一個套件中可以運行的樣本數量。一旦您審查了協議以確定您計劃運行的特定試劑盒可能需要的標準品、控件和空白品的數量，請單擊此處進入樣本計算器。
Q.什么是參考波長？
A.參考波長是用于校正（標準化）主波長OD值的次級波長。這有助于解釋鋼板中的缺陷。
問：為什么450nm是常用的測量波長？
A.測量波長由每個試劑盒中使用的基質確定。最常見的是TMB。它產生一種在650nm波長下可測量的藍色。它可以通過停止與1M磷酸或1M硫酸的反應而用于終點測定。酸化時形成黃色反應產物，其在450nm下可測量。
Q.測量波長和參考波長之間的區別是什么？
A.測量波長和參考波長之間的主要區別在于，第一個波長用于讀取基板產生的吸光度，第二個波長（參考波長）用于檢測板中的缺陷。
問：我可以在沒有參考波長的情況下讀取該板嗎？
答：是的，你可以。然而，使用參考波長可以提高測定的靈敏度。
ELISA故障排除指南
查看完整的ELISA故障排除指南
鋼板清洗不足
對于自動清洗機：檢查噴嘴是否堵塞，驗證分配量，并定期清潔以防止和清除任何堆積物。有關更多維護信息，請參閱用戶手冊。
對于手動沖洗：確保所有井都用沖洗緩沖液強制過滿。避免使用多通道移液管進行清洗?？紤]從清洗瓶切換到手持式歧管或自動洗板機，特別是在進行化學發光分析時。這里提供了顯示正確洗滌技術的視頻。
不要跳過清洗或浸泡步驟。
添加綴合物或基質期間多通道移液管出現問題
檢查多通道移液管校準。確保所有端固定牢固，每次更換端時，吸取相同體積的液體。觀察氣泡并考慮反向吸移技術，以確保氣泡不會干擾吸移精度。參見正向和反向移液視頻。
移液技術
檢查單吸管校準。觀察氣泡并考慮反向吸移技術，以確保氣泡不會干擾吸移精度。參見正向和反向移液視頻。
井內氣泡
確保在每個清洗步驟后用力敲打板，使其干燥，以盡量減少孔中殘留的清洗緩沖液。加入分析試劑（尤其是基質）后殘留在孔中的氣泡應在平板培養和平板讀數之前去除?？梢允褂酶蓛舻囊埔汗芏藖砣コ龤馀?。
僅樣本的重復之間精度差（高CV值）
樣品混合不足
在移液之前對每個樣品進行渦流，以確保樣品均勻。
移液技術
在將第一個樣本復制品轉移到平板之前，將樣本從端吸入和取出兩次，以覆蓋端內部。在轉移樣品時，確保沒有樣品液滴粘附在端的外部。如果容量允許，考慮采用反向吸移技術，以確保氣泡不會干擾吸移精度。參見正向和反向移液視頻。
鋼板清洗不足
對于自動清洗機：檢查噴嘴是否堵塞，驗證分配量，并定期清潔以防止和清除任何堆積物。有關更多維護信息，請參閱用戶手冊。
對于手動沖洗：確保所有井都用沖洗緩沖液強制過滿。避免使用多通道移液管進行清洗?？紤]從清洗瓶切換到手持式歧管或自動洗板機，特別是在進行化學發光分析時。這里提供了顯示正確洗滌技術的視頻。
不要跳過清洗或浸泡步驟。
高樣本和低樣本的結轉
確保每個樣本之間的端都發生了變化。每次孵育時使用新的平板密封劑。
樣品稀釋緩沖液錯誤
如果樣品需要稀釋，確認使用了適當的稀釋緩沖液。
標準曲線不佳（與之前的結果或分析證書不匹配）
鋼板清洗不足
對于自動清洗機：檢查噴嘴是否堵塞，驗證分配量，并定期清潔以防止和清除任何堆積物。有關更多維護信息，請參閱用戶手冊。
對于手動沖洗：確保所有井都用沖洗緩沖液強制過滿。避免使用多通道移液管進行清洗?？紤]從清洗瓶切換到手持式歧管或自動洗板機，特別是在進行化學發光分析時。這里提供了顯示正確洗滌技術的視頻。
不要跳過清洗或浸泡步驟。
移液技術
檢查移液管校準。觀察氣泡并考慮反向吸移技術，以確保氣泡不會干擾吸移精度。參見正向和反向移液視頻。
試劑混合不充分
使用前，讓重組試劑放置在手冊中所示的時間長度內。使用適當的設備（渦流混合器等）確保試劑在使用前是均勻的。如果混合試劑盒試劑以形成“工作"成分，則確認使用了正確的體積和稀釋劑。
板材晃動不足
不正確的搖動運動會導致混合不足和抗體/分析物相互作用。按照使用說明中建議的速度搖動板。建議使用半徑很小的軌道運動振動器。參見示例。
添加到井中的試劑量錯誤
檢查剩余體積，以確認向孔中添加了正確體積的試劑。
制備試劑的儲存
確保所有試劑正確儲存并在規定期限內使用。對于化學發光測定，預先制備魯米諾底物可導致信號降低。
環境溫度低或不一致
遵循方案中所示的培養溫度。
化學發光儀器的差異
信號，或相對光單位（RLU），可以在不同的化學發光板讀數器之間顯著變化。“典型"標準曲線或分析證書中顯示的信號可能與觀察到的信號非常不同。
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